Ceribandin ji bo veqetandina proteîna serumê bi Elektroforeza Membrana Celluloz Acetate

Rêzman

Elektroforeza fîlima acetate ya selulozê rêbazek elektroforez e ku fîlimek acetate ya selulozê wekî piştgirî bikar tîne.Diyardeya ku tê de keriyên barkirî di bin çalakiya qada elektrîkê de ber bi elektroda dijber ve diçin, elektroforez tê gotin.Ji ber ku her proteîn xwedan nuqteyek îzoelektrîkî ya taybetî ye, heke proteînek di nav çareseriyek ku pH wê ji xala wê ya îzoelektrîkî kêmtir be were danîn, dê proteîn bi erênî were barkirin û ber bi elektroda neyînî ve biçe.Berevajî vê, ew ber bi pozê erênî ve diçe.Ji ber ku leza molekulên proteîn ên ku di qada elektrîkê de diçin bi barkirina wan ve girêdayî ye, şekl û mezinahiya molekulan, proteînên cûda dikarin bi elektroforezê ji hev werin veqetandin.Serum cûrbecûr proteînan dihewîne, ku hemî jî di pH7.5 an kêmtir de xalên isoelektrîkî hene.Dema ku serum di tamponek pH 8.6 de tê danîn da ku elektroforez bimeşîne, hemî proteînên serumê bi neyînî bar dikin û dê di qada elektrîkê de ber bi aliyê erênî ve biçin.Ji ber ku cûrbecûr proteînên serumê di heman pH de xwedan barên cûda ne, pirçikên molekulî bi mezinahî cûda ne, û bi vî rengî leza koçkirinê cûda ye, û ew bi elektroforezê ji hev têne veqetandin.Xalên isoelektrîkî û giraniya molekulên proteînên serumê di tabloya jêrîn de têne destnîşan kirin:

Protein

Xalên îzoelektrîkê (PI)

Giraniya molekulî

Albumin

4.88

69 000

α1-gloulin

5.00

200 000

α2-gloulin

5.06

300 000

β-gloulin

5.12

9 000 ~ 150 000

γ-gloulin

6,85~7,50

156 000~ 300 000

1

Ezmûn ew e ku proteînên cihêreng ên di seruma xwînê de bi parzûna seluloz acetate (abrr. CAM) ve wekî medyaya piştgirî were veqetandin.CAM cureyekî kefxwarinê yeefîlimek bi unîformek baş, û qalindahiya wê 0.1mm-1.5mm e, ku xwedan avdanek taybetî ye.

Materyal, amûr û reagentên ji bo Elektroforeza CAM

Nimûne:seruma xwîna mirovan saxlem

Alet:dabînkirina hêzê DYY-6C, tanka elektroforezê DYCP-38C, barkirina nimûneya bilind WD-9404

1-4

The reagents

1) Parzûna selulozê acetat 7X9cm

2) Çareseriya tamponê barbitol PH 8,6 (hêza îyonîkî 0,05-0,09, ew dem 0,06 e.): 1,84 g Diethyl barbituric asîdê bistînin, û paşê 1,03 g Diethyl sodyum pentobarbital bistînin, hinek ava distîlkirî lê zêde bikin ku germ bibe ku were hilweşandin, û çêbikin. heta 1000 ml;

3) Reqandin: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, 100ml ava distîlkirî lê zêde bike;

4) TBS/T an PBS/T: 45ml 95% etanol, 5ml asîda acetîk a glacial, 50ml ava şilandî lê zêde bike;

5) Çareseriya Paqijkirinê: 70 ml etanolê bêhîdro, 30 ml asîda acetîk a glacial.

Experiment Method

1) Parzûnê amade bikin: Perçeyê 30 hûrdem-8h di nav çareseriya tamponê ya barbitolê de bihêlin, û jê derxin, bi kaxezê vegirtinê çareseriya zêde jê bikin.

2) Nimûneyên barkirinê: Aliyê zirav û aliyek nermî yê membranê ji hev veqetînin, û xêzek bi dûrahiya 1.5 cm heya dawiya jorîn li ser milê zirav destnîşan bikin.Nimûneyan ji hêla amûra barkirina nimûneya bilind ve li ser milê hişk bar bikin.Nîşe: Nimûne divê li milê zirav yê membranê bêne barkirin.Piştî ku nimûneyên serumê bi tevahî di nav membranê de derbas dibin, li ser membranê bizivirin, aliyê hişk (bi nimûneyan) ber bi tankê ve bihêlin, û dawiya nimûneyan di elektrodê neyînî de tê danîn.

3) Electrophoresis: 0.4-ê dabînkirina hêzê vekinPerçeya 0.6m A / cm, dema xebitandinê 30-45 min e.Piştî ku elektroforez dimeşîne, elektrîkê qut bikin.

4) Neqandin û paqij kirin: Perçeyê ji tankê derxînin, û binav bikinit 5 hûrdeman têxin nav çareseriya boyaxê, û dûv re wê 3-4 carî di nav çareseriya paqijkirinê de paqij bikin heya ku rengê paşîn zelal bibe.Pêdivî ye ku proteînên serumê li ser bendan bêne xuyang kirin, û bi gelemperî pênc dever hene, ku dawiya jorîn a xeta nîşankirî, Albumîn, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin pêk tê.

5) Parastin: Elektroforeza hişk danînkoma10-15 hûrdeman di nav çareseriya paqijkirinê de, û paşê jê derxin û li ser cama paqij bixin, piştî ku zuwa bibe, ew ê bibe fîlimek zelal.koma.

CeribandinîNetîce

1-3

Bandora veqetandinê ya nimûneyên serumê baş e, û fenomenek dûvikê bandê tune.Dubarebûna encaman ji ber prosedurên ceribandinê û rêbazên ceribandinê diguhere, û dubarebûn zêde ye.

Xelasî

Pergala tespîtkirina elektroforez a klînîkî ya bilez (Tankek elektroforezDYCP-38C,navê minDYY-6C û barkirina nimûneya bilind WD-9404) ku ji hêla me ve hatî hilberandinşîrketa Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdpêdiviyên ceribandinê pêk tîne,ûencamên dubare, sade û bi lez in, minasib ji bohînkirinlêkolîn.

Beijing LiuyiBiotechnology Co., Ltd di çêkirina hilberên elektroforezê de ji bo pîşesaziya zanistiya jiyanê, ku pispor e, pispor e.li Chinaînê ji 50-salî zêdetir dîrok heye û pargîdanî dikare li çaraliyê cîhanê hilberên domdar û kalîteyê peyda bike.Di nav salên pêşkeftinê de, ew hêjayî hilbijartina we ye!

Em naha li hevkaran digerin, hem tanka elektroforez a OEM hem jî belavker têne pêşwazî kirin.

Ji bo bêtir agahdarî li ser me, ji kerema xwe bi e-nameyê bi me re têkilî daynin[email parastî]an[email parastî].


Dema şandinê: Nov-14-2022