Elektroforeza gel a polyacrylamide çi ye?

Polyacrylamide Gel Electrophoresis

Elektroforeza gel teknîkek bingehîn e di laboratuarên li seranserê dîsîplînên biyolojîkî de, ku destûrê dide veqetandina makromolekulên wekî DNA, RNA û proteînan. Medya û mekanîzmayên cudabûnê yên cihêreng dihêle ku binekomên van molekulan bi karanîna taybetmendiyên xwe yên laşî bi bandortir ji hev veqetin. Bi taybetî ji bo proteînan, elektroforeziya gel a polyacrylamide (PAGE) bi gelemperî teknîka bijartî ye.

PAGE teknîkek e ku makromolekulên wekî proteînan li ser bingeha tevgera wan a elektroforetîkî vediqetîne, ango şiyana analîzan ku ber bi elektrodek berevajî barkirinê ve diçin. Di PAGE de, ev ji hêla barkêş, mezinahî (giraniya molekulî) û şiklê molekulê ve tê destnîşankirin. Analît di nav porên ku di gela polakrîllamîdê de hatine çêkirin re derbas dibin. Berevajî ADN û RNA-yê, proteîn li gorî asîdên amînî yên ku têne tevlihev kirin diguhezin, ku dikare bandorê li awayê xebitandina wan bike. Di heman demê de têlên amînoasîdê jî dibe ku strukturên duyemîn ava bikin ku bandorê li mezinahiya wan a diyar dike û di encamê de ka ew çawa dikarin di nav poran de bimeşin. Ji ber vê yekê dibe ku carinan were xwestin ku proteînan berî elektroforezê denature bikin da ku wan rêz bikin ger texmînek rastîn a mezinahiyê hewce bike.

SDS PAGE

Elektroforeza gel a polyacrylamide sodyum-dodecyl sulfate teknîkek e ku ji bo veqetandina molekulên proteîn ên girseyên 5 heya 250 kDa tê bikar anîn. Proteîn tenê li ser bingeha giraniya molekulê têne veqetandin. Sodyum dodecyl sulfate, surfaktantek anyonîk, di amadekirina jelê de tê zêdekirin ku barên xwerû yên nimûneyên proteîn mask dike û barek wekhev a berbi girseyê dide wan. Bi gotineke hêsan, ew proteînan denature dike û barekî neyînî dide wan.

PAGE Native

Native PAGE teknolojiyek e ku ji bo veqetandina proteînan gêlên ne-denatûred bikar tîne. Berevajî SDS PAGE, di amadekirina jelê de ti ajanek denaturker nayê zêdekirin. Di encamê de veqetandina proteînan li ser bingeha bar û mezinahiya proteînan pêk tê. Di vê teknîkê de, pêkvebûn, pêçandin û zincîrên asîda amînî yên proteînan faktorên ku veqetandin bi wan ve girêdayî ye. Proteîn di vê pêvajoyê de zirarê nabin, û piştî bidawîbûna veqetandinê dikarin werin vegerandin.

Elektroforeza gel a polyacrylamide (PAGE) çawa dixebite?

Prensîba bingehîn a PAGE ev e ku analîzan ji hev veqetîne bi derbasbûna wan di nav porên gêlekek polîakrîlamîdê de bi karanîna herikîna elektrîkê. Ji bo bidestxistina vê yekê, tevliheviyek acrylamide-bisacrylamide bi lêzêdekirina ammonium persulfate (APS) polîmerîze kirin (polyacrylamide). Reaksiyona ku ji hêla tetramethylethylenediamine (TEMED) ve tê katalîz kirin, avahiyek mîna tevnek bi poran çêdike ku analît dikarin di nav de bilivînin (Wêne 2). Rêjeya tevaya acrylamide ya ku di gêlê de tê de zêde dibe, mezinahiya porê piçûktir dibe, ji ber vê yekê proteînên ku dê karibin jê re derbas bibin piçûktir dibin. Rêjeya acrylamide û bisacrylamide jî dê bandorê li mezinahiya porê bike lê ev pir caran domdar tê girtin. Pîvana porên piçûktir jî leza ku proteînên piçûk dikarin di nav gêlê de bigerin kêm dikin, çareseriya wan baştir dike û nahêle ku ew bi lez û bez di nav tamponê de gava ku niha tê sepandin.

Amûrên ji bo Elektroforeza Gel a Polyacrylamide

Hucreya Elektroforeza Gel (Tank/Ode)
Tanka gêlê ya ji bo elektroforeziya gel a polyacrylamide (PAGE) ji tanka gel a agarose cuda ye. Tanka gel a agarose horizontî ye, dema ku tanka PAGE vertîkal e. Ji hêla hucreya elektroforezê ya vertîkal (tank/ode), jelek tenik (bi gelemperî 1,0 mm an 1,5 mm) di navbera du lewheyên camê de tê rijandin û wusa tê danîn ku binê gêlê di yek jûreyek de di tamponê de bihêle û jor jî di tamponê de bin. li odeyeke din. Dema ku niha tê sepandin, mîqdarek piçûk a tampon di nav gel de ji jûreya jorîn berbi jûreya jêrîn ve diçe. Bi kelepçeyên bihêz ên ku garantî dikin ku meclîs di pozîsyonek rast de bimîne, alav rêvekirina gêlê ya bilez digel sarbûn û sarbûnê jî hêsantir dike û di encamê de bendikên cihêreng çêdibe.

Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) hejmarek ji mezinahiya hucreyên elektroforeziya gelî ya polyacrylamide (tank / ode) çêdike. Modelên DYCZ-20C û DYCZ-20G hucreyên elektroforez ên vertîkal (tank / ode) ne ji bo analîzkirina rêzikên DNA. Hin hucreyên elektroforez ên vertîkal (tank / ode) bi pergala blottingê re hevaheng in, mîna modela DYCZ-24DN, DYCZ-25D û DYCZ-25E bi modela pergala Blotting Western-ê modela DYCZ-40D, DYCZ-40G û DYCZ-40F re hevaheng in, ku ji bo veguheztina molekula proteînê ji gêlê ber bi parzûnê ve têne bikar anîn. Piştî elektroforeziya SDS-PAGE, Western Blotting teknîkek e ku proteînek taybetî di tevliheviyek proteîn de kifş dike. Hûn dikarin van pergalên blotkirinê li gorî hewcedariyên ceribandinê hilbijêrin.

Dabînkirina Hêzê ya Electrophoresis
Ji bo peydakirina elektrîkê ji bo xebitandina gel, hûn ê hewceyê dabînkirina hêzê ya elektroforez bikin. Li Liuyi Biotechnology em ji bo hemî serîlêdan rêzek dabînkirina hêzê ya elektroforez peyda dikin. Modela DYY-12 û DYY-12C bi voltaja domdar û niha ya bilind dikare elektroforeziya hewcedariya voltaja bilind bicîh bîne. Ew fonksiyona stand, dem, VH û serîlêdana gav-gav heye. Ew ji bo serîlêdana elektroforezê ya IEF û DNA-ê îdeal in. Ji bo serîlêdana elektroforeziya giştî ya proteîn û DNA, me modela DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, û hwd heye, ku di heman demê de bi hucreyên elektroforez (tank / jûreyên) jî dabînkirina hêza firotanê ya germ in. Vana dikarin ji bo serîlêdanên elektroforeziya voltaja navîn û nizm, wekî ji bo karanîna laboratûara dibistanê, laboratûara nexweşxaneyê û hwd werin bikar anîn. Zêdetir modelên ji bo dabînkirina hêzê, ji kerema xwe biçin malpera me.

Marqeya Liuyi li Chinaînê xwedan dîrokek 50-salî ye û pargîdanî dikare li çaraliyê cîhanê hilberên stabîl û bi kalîte peyda bike. Di nav pêşkeftina salan de, ew hêjayî hilbijartina we ye!

Ji bo bêtir agahdarî li ser me, ji kerema xwe bi e-nameyê bi me re têkilî daynin[email parastî] or [email parastî].

Çavkanî ji bo Elektroforeza gel a polyacrylamide çi ye?
1. Karen Steward PhD Elektroforeza gel a Polyacrylamide, Çawa Kar dike, Guhertoyên Teknîkî, û Serîlêdanên Wê