Prensîba Experiment
Elektroforeza hemoglobînê armanc dike ku hemoglobînên cûda yên normal û anormal tespît bike û piştrast bike.
Ji ber bar û xalên cuda yên îzoelektrîkê yên cureyên cuda yên hemoglobînê, di çareseriyek tampon a pH de, dema ku xala îzoelektrîkî ya hemoglobînê ji pHya çareseriya tampon kêmtir be, hemoglobîn barek neyînî hildigire û di dema elektroforezê de ber bi anodê ve diçe. Berevajî vê, hemoglobîn bi barek erênî ber bi katodê ve diçe.
Di bin voltajek diyarkirî de û piştî demek elektroforezek taybetî, hemoglobînên bi bar û giraniyên molekulî yên cihêreng rê û lezên koçberiyê yên cihêreng nîşan didin. Ev rê dide veqetandina deverên cihêreng, û dûv re analîza şopandina rengdêr an elektroforetîkî dikare li ser van deveran were kirin da ku hemoglobînên cihêreng bihejmêre. Rêbaza ku herî zêde tê bikar anîn elektroforeziya membrana selulozê acetate pH 8.6 e.
Di nav sîtoplazmayê de, komên etilen glycol (CHOH-CHOH) ku di glycogen an jî madeyên polysaccharîd de hene (wekî mucopolysaccharides, mucoproteins, glycoproteins, glycolipids, etc.) ji hêla asîdê perîyodîk ve têne oksîd kirin û dibin komên aldehîdê (CHO-CHO). Van komên aldehîdê bi reagenta Schiff-ê ya bêreng-sor-bêreng re tevdigerin, rengê mor-sorê çêdikin ku li cihê ku polysaccharîd di şaneyê de hene depo dike. Ev reaksiyonê wekî rengkirina periyodîk a acid-Schiff (PAS) tê zanîn, ku berê wekî rengkirina glycogen tê binav kirin.
Rêbaz Ceribandin
Materyal:Cellulose acetatemembrane, amûra elektroforez(DYCP-38C û dabînkirina hêzê DYY-6C), Amûra Barkirina Nimûneya Bilind(pipette), spectrophotometer, cuvettes colorimetric, tampon.
Tampon:
(1) pH 8,6 TEB Tampon: 10,29 g Tris, 0,6 g EDTA, 3,2 g asîda boric, û ava distîlkirî têxin 1000 ml.
(2) Tamponê borat: 6,87 g boraks û 5,56 g asîdê borikê giran bikin, û ava distîlkirî li 1000 ml zêde bikin.
Doz:
Psererastkirina Çareseriya Hemoglobînê
Wek antîkoagulant 3 ml xwîna ku heparîn an sodyûm sîtrate heye bigire. Bi 2000 rpm 10 deqeyan santrîfuj bikin û plazmayê bavêjin. Hucreyên xwînê yên sor sê caran bi salona fîzyolojîk (750 rpm, her car 5 deqîqe santrîfugasyon) bişon. Di 2200 rpm de 10 hûrdeman santrîfuj bikin û spernatant biavêjin. Bi qasî hev ava distîlkirî lê zêde bikin, paşê 0,5 qatê qebareya tetrachloride karbonê lê zêde bikin. Bi xurtî 5 hûrdeman bihejînin, û dûv re 10 hûrdeman di 2200 rpm de santrîfuj bikin da ku çareseriya Hb ya jorîn ji bo karanîna paşê berhev bikin.
Avêtina Membranê
Parzûna selulozê acetate bi qatên 3 cm × 8 cm qut bikin. Wan di tamponek pH 8,6 TEB de bihêlin heya ku bi tevahî têr bibin, dûv re jê bikin û bi kaxezê parzûnê zuwa bikin.
Spotting
Pîpetek bikar bînin ku 10 μl ji çareseriya hemoglobînê bi rengek vertîkal li ser perdeya selulozê acetate (aliyê zirav), bi qasî 1,5 cm ji qiraxê veqetînin.
Elektroforesis
Çareseriya tampon a boratê birijînin nav odeya elektroforezê. Parzûna acetate ya selulozê bi aliyê xêzkirî ve li dawiya katodê ya odeyê bixin. 30 hûrdeman di 200 V de bixebitin.
Elution
Zeviyên HbA û HbA2 jêkin, wan bixin nav lûleyên ceribandinê yên cihê, û bi rêzê 15 ml û 3 ml ava distîlkirî lê zêde bikin. Bi nermî bihejînin da ku hemoglobîn bi tevahî were rijandin, dûv re tevlihev bikin.
Colorimetry
Bi karanîna ava distîlkirî ya ji bo çareseriya şuştinê, vegirtinê sifir bikin û di 415 nm de vegirtinê bipîvin.
Hesabkirînî
HbA2(%) = Absorbasyona lûleya HbA2 / (Absorbasyona lûleya HbA × 5 + Absorbasyona lûleya HbA2) × 100%
Hesabkirina Encamên Ezmûnî
Rêjeya referansê ji bo pH 8,6 TEB Tampon Elektroforeza Celluloz Acetate: HbA > 95%, HbA2 1%-3,1%
Têbînî
Divê dema elektroforez zêde dirêj nebe. Divê parzûna selulozê acetate di dema elektroforezê de zuha nebe. Dema ku HbA û HbA2 bi zelalî ji hev veqetin, elektroforez rawestînin. Elektroforeza demdirêj dikare bibe sedema belavbûna bandê û şilbûnê.
Ji karanîna pir nimûne dûr bixin. Zêdebûna hemoglobînê dikare bibe sedema qutbûna bandê an rengvedanek têr nake, û di encamê de asta HbA bi xeletî zêde dibe.
Pêşîlêgirtina gemarîbûna parzûna selulozê acetate bi proteînan.
Divê niha zêde ne zêde be; Wekî din, bendên hemoglobînê dikarin ji hev veneqetin.
Her gav nimûneyên ji mirovên normal û hemoglobînên anormal ên naskirî yên pêwîst wekî kontrolê têxin nav xwe.
Beijing Liuyi Biotechnology ji bo elektroforeziya hemoglobînê tanka elektroforez a profesyonel çêdike ku model e.DYCP-38CTankek elektroforez a membrana selulozê acetate, û du modelên dabînkirina hêzê ya elektroforezê ji bo tanka elektroforez a membrana acetate ya selulozê heneDYY-2CûDYY-6Cnavê min.
Di vê navberê de, Biyoteknolojiya Beijing Liuyi ji xerîdaran re membrana acetate selulozê peyda dike, û mezinahiya membrana acetate ya selulozê dikare were xweş kirin. Hûn bi xêr hatin ku ji me nimûne û bêtir agahdarî bipirsin.
Beijing Liuyi li Chinaînê xwedan dîrokek 50-salî ye û pargîdanî dikare li çaraliyê cîhanê hilberên stabîl û kalîteyê peyda bike. Di nav salên pêşkeftinê de, ew hêjayî hilbijartina we ye!
Em naha li hevkaran digerin, hem tanka elektroforez a OEM hem jî belavker têne pêşwazî kirin.
Ger we ji bo hilberên me planek kirînê heye, ji kerema xwe dudilî nebin ku bi me re têkilî daynin. Hûn dikarin bi e-nameyê ji me re peyam bişînin[email parastî]an[email parastî], an ji kerema xwe li +86 15810650221 bi me re telefon bikin an Whatsapp +86 15810650221 lê zêde bikin, an jî Wechat: 15810650221
Dema şandinê: Sep-20-2023