Teknîkên Bingehîn ên Elektroforeza Gel a Agarose (1)

1. Tesnîfkirin

Elektroforeza gel li cureyên vertîkal (tevî gêlên stûn û gêlên slabê jî tê de) û celebên horizontî (bi giranî gêlên slabê) tê dabeş kirin (Wêne 6-18). Bi gelemperî, veqetandina vertîkal hinekî ji horîzontal bilindtir e, lê amadekirina gêlê ya horizontî bi kêmî ve çar avantajên xwe hene: di binê tevaya gêlê de piştgirî heye, ku destûrê dide karanîna agarose ya kêm-konsantreyî; gengaz e ku meriv plakên gêlê agarose yên taybetmendiyên cûda amade bike; amadekirina gel û barkirina nimûneyê hêsantir e; jûreya elektroforez çêkirinê hêsan e û biha-bandor e. Ji ber ku elektroforeziya horizontî bi plakaya gêla agarozê ku bi tevahî 1 mm li binê rûbera tampona elektroforezê di binê avê de ye tê kirin, jê re elektroforeziya binavbûyî jî tê gotin.

图片2

Tanka Elektroforezê DYCP-31DN ji bo elektroforeziya gel agarose

2.Buffer System

Di veqetandina asîda nukleîk de, pir pergalên pergalên domdar dipejirînin. Tamponên elektroforezê yên ku bi gelemperî têne bikar anîn TBE (0,08mol/L Tris·HCl, pH 8,5, 0,08mol/L asîdê borik, 0,0024mol/L EDTA) tampon û THE (0,04mol/L Tris·HCl, pH 7,8, 0,02mol/L). acetate sodyûm, 0,0018mol/L EDTA) tampon. Van tamponan bi gelemperî wekî çareseriyên stok 10x têne amade kirin û dema ku têne bikar anîn heya pîvana pêwîst têne rijandin. Rêjeyên koçberiyê yên ADN-ya xêzik û dorhêl di gêla agarose de li gorî tampona ku tê bikar anîn diguhere. Di tampon THE de, rêjeya koçkirina ADN-ya xêzik ji ya ADN-ya dorhêlî mezintir e, dema ku di tampon TBE de, berevajî rast e.

3

3.Amadekirina Agarose Gel

(1) Amadekirina Gel Agarose Horizontal

(a) Bi karanîna 1x tampona elektroforezê, giraniya hewce ya gel agarose amade bikin.

(b) Agarozê germ bikin da ku temam bibe, an di hemamek ava kelandî de, li ser hevkêşek magnetîkî, an jî di mîkropêl de. Çareseriya agarozê heta 55°C sar bikin û boyaxa etîdyum bromîd (EB) bi giraniya dawî ya 0,5 μg/ml lê zêde bikin.

(c) Kevirên cam an lewheyên akrilîk bi mîqdarek piçûk a gêlê agarose ve girêbidin, kevçîyek lê zêde bikin, û diranên komê bi qasî 0,5-1,0 mm li jorê plakê bi cih bikin.

(d) Çareseriya gêla agarose ya heliyayî bi domdarî di qalibê şûşê an plakaya akrilîk de birijînin (qûrbûn bi qebareya nimûneya DNA ve girêdayî ye), ji danasîna gulikên hewayê dûr bikevin. Bila ew bi xwezayî li germahiya odeyê hişk bibe.

(e) Piştî hişkbûna tam bi baldarî şûşê derxînin. Mîqdarek guncav ji tampona elektroforezê li tanka gêlê zêde bikin, pê ewle bin ku plakaya gel bi qasî 1 mm li binê rûbera tampona elektroforezê di binê avê de ye.

(2) Amadekirina Gel Agarose Vertical

(a) Bi şuştina bi etanolê rûn an bermayiyê ji lewheyên camê derxînin.

(b) Pelqeyên cihêkerê di navbera bendavên pêş û paş de bixin, keviyên lewheyên veqetandî bi bendavên pêş û paşîn re rêz bikin, û wan bi kelemçeyan ewle bikin.

(c) 2% agarozê di 1x tamponê de di navbera keviyên lewheyên cihêker de zêde bikin da ku li binê jûreya avêtina gêlê fîşekek agarozê ya 1 cm bilind çêbike.

(d) Gela agarozê ya heliyayî, ku di 1x tamponê de hatî amadekirin, bi qasî 1 cm di binê jorê de birijînin hundurê odeya gêlê.

(e) Komê têxin nav diranan, ji girtina bilbilên hewayê di bin diranên komê de nehêlin. Carinan dibe ku di dema sarbûna gêla agaroseyê de li ser diranên komê qermîçok xuya bibin; Di rewşên weha de, bi tenê hin agarose heliyayî li jor lê zêde bikin da ku wê zexm bikin.

(f) Kûçikê rakin. Ji bo pêşîlêgirtina rijandina tamponê di hêlîna barkirinê de, pêwendiya di navbera plakaya gêla agarose û odeya elektroforezê de bi %2 agarozê ve girêbide û mîqdara tamponê ya pêwîst lê zêde bike.

(g) 1x tampon elektroforezê li odeya gel zêde bikin.

(h) Nimûneyên DNA bi baldarî li gêla agarose ya li binê tamponê bar bikin.

3

Zêdetir agahdarî li ser zanyariya bingehîn di derbarê elektroforeziya gel agarose de, em ê hefteya pêş de parve bikin. Xwezî ev agahdarî ji ceribandina we re bibin alîkar.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ji 50 salan zêdetir bi tîmê meya teknîkî ya profesyonel û navenda R&D re di çêkirina amûrên elektroforez de pispor e. Me xeta hilberîna pêbawer û bêkêmasî ji sêwiranê heya teftîşê, û wargeh, û hem jî piştgiriya kirrûbirrê heye. Berhemên me yên sereke Hucreya Elektroforesis (tank / ode), Dabînkirina Hêzê ya Elektroforesis, Transilluminatora Blue LED, Transilluminator UV, Pergala Wêne û Analîzê ya Gel hwd.

Em naha li hevkaran digerin, hem tanka elektroforez a OEM hem jî belavker têne pêşwazî kirin.

Ger we ji bo hilberên me planek kirînê heye, ji kerema xwe dudilî nebin ku bi me re têkilî daynin. Hûn dikarin bi e-nameyê ji me re peyam bişînin[email parastî]an[email parastî], an ji kerema xwe li +86 15810650221 bi me re telefon bikin an Whatsapp +86 15810650221 lê zêde bikin, an jî Wechat: 15810650221.

Ji kerema xwe koda QR bişopînin da ku li Whatsapp an WeChat zêde bikin.

2


Dema şandinê: Dec-07-2023